薄層色譜法是常用的微量分析方法，廣泛應(yīng)用中草藥研究和日常檢驗(yàn)，但常出現(xiàn)斑點(diǎn)異?，F(xiàn)象給結(jié)果判斷帶來(lái)困難，應(yīng)注意避免和克服。
1、拖尾現(xiàn)象
拖尾現(xiàn)象在薄層色譜中較為常見(jiàn)，結(jié)果使斑點(diǎn)間界限模糊，結(jié)果難以判斷。
產(chǎn)生原因及解決方法
(1)點(diǎn)樣過(guò)量在薄層色譜過(guò)程中化合物在薄層板上進(jìn)行吸附———解吸附的移動(dòng)過(guò)程中，任何一類吸附劑，它們的負(fù)載化合物的能力是有一定限度的，因點(diǎn)樣過(guò)量而超載后，過(guò)剩的化合物被拋在后面，形成拖尾現(xiàn)象。
(2)重復(fù)點(diǎn)樣樣點(diǎn)雖在同一垂直線而樣點(diǎn)圓心未重合，致使樣點(diǎn)呈近橢圓形，也是形成拖尾現(xiàn)象的又一原因，為避免以上異?，F(xiàn)象，應(yīng)選擇合適的點(diǎn)樣量和復(fù)點(diǎn)樣過(guò)程中，樣點(diǎn)圓心應(yīng)重合。
2、邊緣效應(yīng)
邊緣鏟應(yīng)是樣品在層析時(shí)，薄層板兩邊的斑點(diǎn)比中間斑點(diǎn)移動(dòng)快，并向兩邊偏斜。其原因是用混合溶劑展開(kāi)過(guò)程中，其中極性較弱和沸點(diǎn)較低的溶劑在薄層板兩邊沿處較易揮發(fā)，使薄層板上展開(kāi)劑的比例不一致，極性發(fā)生變化，而出現(xiàn)邊緣效應(yīng)。
為避免上述現(xiàn)象的出現(xiàn)：增加層板缸中溶劑蒸氣濃度，在層析缸內(nèi)壁貼上浸濕展開(kāi)劑的濾紙或選擇內(nèi)徑和長(zhǎng)度適宜的層析缸進(jìn)行層析。選擇適宜的單一溶劑代替混合溶劑。采用共沸溶劑代替一般混合溶劑。
3、S形及波形斑點(diǎn)
S形斑點(diǎn)是指含多種成分的樣品層析時(shí)，斑點(diǎn)不是順次分布于原點(diǎn)至展開(kāi)前沿的垂直線上，而是呈s形分布于垂直線兩側(cè)。波形斑點(diǎn)是指某些含多種成分的樣品液，順次點(diǎn)于同一起始線上，展開(kāi)后，這些成分相同的斑點(diǎn)不呈直線狀平行于起始線，而是呈波浪形。
產(chǎn)生原因?yàn)楸影搴癖〔粍颉楸苊馍鲜霈F(xiàn)象的出現(xiàn)應(yīng)選用厚薄均勻的薄層板。
4、念珠狀斑點(diǎn)
念珠狀斑點(diǎn)是指化合物斑點(diǎn)之間距離小，相互連接呈念珠狀。
產(chǎn)生原因及克服方法：樣品中成分過(guò)多，在一定長(zhǎng)度的薄層板上，排布不開(kāi)，彼此重疊。可適當(dāng)增加層析板長(zhǎng)度，使斑點(diǎn)距離加大或采用雙向?qū)游?，使所含成分向兩個(gè)方向展開(kāi)可以避免念珠狀斑點(diǎn)的出現(xiàn)。多次點(diǎn)樣時(shí)，點(diǎn)樣中心不重合，形成復(fù)斑。應(yīng)以適當(dāng)濃度供試液一次點(diǎn)樣，若多次點(diǎn)樣，點(diǎn)樣中心必須重合。
5、展開(kāi)后斑點(diǎn)RF值不穩(wěn)定斑點(diǎn)RF值與文獻(xiàn)規(guī)定不符或重復(fù)操作RF值時(shí)大時(shí)小。
主要原因?yàn)椋簩游鰷囟炔环€(wěn)定，在采用混合溶劑展開(kāi)時(shí)，由于溫度不穩(wěn)定使展開(kāi)劑的比例發(fā)生變化。薄層厚薄不勻。吸附劑溶劑質(zhì)量差異。根據(jù)以上原因在層析過(guò)程中除選擇質(zhì)量較好的吸附劑與溶劑外，同批或同一品種應(yīng)選擇同廠、同批號(hào)的吸附劑和溶劑，層析時(shí)室溫差控制在5℃之間，制板時(shí)吸附劑顆粒應(yīng)選擇直徑顆粒制板，板材平整，薄層厚薄均勻。