開光復(fù)明丸來源于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(中藥成方制劑)第3冊(cè)收載品種。是由梔子、黃芩等18味中藥組成的復(fù)方制劑，具有清熱散風(fēng)、退翳明目等作用。用于肝肺熱盛引起爆發(fā)火眼，紅腫痛癢，眼瞼赤爛，云翳氣蒙，羞明多眵等治療。為有效控制其成品質(zhì)量，對(duì)其成品中主要成分黃連、黃柏、大黃、防風(fēng)、當(dāng)歸、赤芍、冰片進(jìn)行了薄層色譜儀鑒別研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法簡便可行，重現(xiàn)性好，薄層圖譜清晰，陰性對(duì)照無干擾。檢索近幾年的相關(guān)文獻(xiàn)，未曾發(fā)現(xiàn)有關(guān)開光復(fù)明丸制劑質(zhì)量控制的相關(guān)報(bào)道，現(xiàn)將有關(guān)開光復(fù)明丸的薄層色譜儀鑒別研究的具體方法報(bào)告如下。
1 實(shí)驗(yàn)材料
ZF型紫外透射反射分析儀;硅膠G薄層板(100mm×100mm);層析缸;黃連、黃柏、大黃、防風(fēng)、當(dāng)歸、赤芍、冰片對(duì)照藥材和鹽酸小檗堿對(duì)照品(均購自中國藥品生物制品檢定所);開光復(fù)明丸三批(批號(hào)分別為：6013834、6013835、6013836，同仁堂制藥廠提供);實(shí)驗(yàn)用化學(xué)試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 黃連、黃柏的鑒別[1] 取本品1丸，剪碎，加甲醇20ml，超聲處理20min，濾過，濾液揮至2ml，作為供試品溶液。另取黃連、黃柏對(duì)照藥材各0.1g，分別加甲醇 10ml，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備缺黃連的陰性對(duì)照溶液、缺黃柏的陰性對(duì)照溶液和黃連、黃柏都缺的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，吸取上述7種溶液各2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6：3：2：1.5：0.3)為展開劑加入雙槽展開缸中，另一槽加入等體積的濃氨試液，預(yù)平衡15min，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖1)。
2.2 大黃的鑒別[1，2] 取本品1丸，剪碎，加甲醇20ml，超聲處理20min，濾過，濾液蒸干，加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，加熱回流30min，立即冷卻，用乙醚分 2次振搖提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)佣燃淄?ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備不含大黃的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以石油醚(30℃～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn);置氨蒸氣中熏后，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖2)。
2.3 防風(fēng)的鑒別[3] 取本品4丸，剪碎，加二氯甲烷30ml，濃氨試液2ml，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取防風(fēng)對(duì)照藥材 0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備不含防風(fēng)的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄Ⅵ B)試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯(4：1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖3)。
2.4 當(dāng)歸的鑒別[1] 取本品2丸，剪碎，加乙醚30ml，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備不含當(dāng)歸的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(4：1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖4)。
2.5 赤芍的鑒別[1] 取本品2丸，剪碎，加乙醇30ml，加熱回流2h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱(100～200目，1g，內(nèi)徑1cm) 上，用乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸至1ml，作為供試品溶液。另取赤芍對(duì)照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5 min，濾過，濾液蒸至1ml，作為對(duì)照藥材溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備不含赤芍的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005 年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40：5：10：0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖5)。
2.6 冰片的鑒別[4] 取本品1丸，剪碎，加乙酸乙酯15ml，超聲處理30min，濾過，濾液蒸至1ml，作為供試品溶液。另取冰片對(duì)照藥品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。再按處方比例，同供試品溶液制備方法制備不含冰片的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(17：3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在 105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照溶液無上述斑點(diǎn)(見圖6)。
3 討論
本試驗(yàn)中對(duì)其成品中主要成分黃連、黃柏、大黃、防風(fēng)、當(dāng)歸、赤芍、冰片進(jìn)行了薄層色譜鑒別研究，均采用了陰性對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果表明，各檢出成分不受處方中其他群藥的干擾，圖譜完整，方法穩(wěn)定，斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好，可作為開光復(fù)明丸制劑的有效定性鑒別方法。
